河南农业大学王田林获国家专利权
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龙图腾网获悉河南农业大学申请的专利一种基于复合纳米材料的食源性致病菌检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116660232B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310717347.7,技术领域涉及:G01N21/64;该发明授权一种基于复合纳米材料的食源性致病菌检测方法是由王田林;黄现青;李天歌;付雅娜;宋莲军;刘晓梦;马燕;李宁;乔明武设计研发完成,并于2023-06-16向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于复合纳米材料的食源性致病菌检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于复合纳米材料的食源性致病菌检测方法,属于食品安全检测技术领域;基于CeCH3COO3、鸟苷‑5’‑单磷酸二钠GMP和2,6‑吡啶二羧酸DPA合成具有类酶活性的铈基纳米材料DPA‑Ce‑GMP,以普鲁士蓝为载体,万古霉素用来识别革兰氏阳性菌,构建了一个具有靶向、氧化酶特性的复合纳米材料PB@DPA‑Ce‑GMP@Van,简称PCV,PCV可精准吸附在革兰氏阳性菌表面,形成PCV革兰氏阳性菌复合体;经离心上清液中残留的PCV可以猝灭东茛菪内酯SC的荧光,同时使荧光红染料AR的荧光强度增加,以荧光强度比SCAR作为检测信号输出。本发明实现了一种快速检测细菌的复合纳米平台,其灵敏度高,抗干扰能力强,检测范围可达101~107CFUmL,检测限低至5CFUmL。
本发明授权一种基于复合纳米材料的食源性致病菌检测方法在权利要求书中公布了:1.一种基于复合纳米材料的食源性致病菌检测方法,其特征在于:包括以下步骤: S1、制备食源性致病菌的待测菌液: 使用接种环沾取冻存管中的革兰氏阳性菌,并采用划线接种法进行菌种培养,经梯度稀释后得到细菌浓度为0~107CFUmL的待测菌液; S2、生物传感体系材料PB@DPA-Ce-GMP@Van的合成: 以浓度为0.1~0.3mgmL的普鲁士蓝PB作为载体,经超声溶解后加入鸟苷-5’-单磷酸二钠GMP与CeCH3COO3的混合溶液中,用混合仪振荡混匀后进行离心,去除上清液,用去离子水洗涤后加入去离子水复溶,混合均匀后加入2,6-吡啶二羧酸DPA,待颜色变为透亮的蓝色,将溶液在紫外下照射2~4h,后进行真空冷冻干燥备用,得到PB@DPA-Ce-GMP溶液; 再将沉淀复溶于去离子水中,加入浓度为10~20μgmL的万古霉素Van,超声处理后,最终得到生物传感体系材料PB@DPA-Ce-GMP@Van; S3、食源性致病菌的检测: 在上述步骤S2中合成的生物传感体系材料PB@DPA-Ce-GMP@Van中加入上述步骤S1中细菌浓度为0~107CFUmL的革兰氏阳性菌菌液,室温下孵育2h,离心后取上清液,孵育后形成PB@DPA-Ce-GMP@Van革兰氏阳性菌复合体; 上清液中PB@DPA-Ce-GMP@Van猝灭东茛菪内酯SC的荧光,同时使荧光红染料AR的荧光强度增加,以荧光强度比SCAR作为检测信号输出,传感体系荧光响应为纵坐标,革兰氏阳性菌的菌液浓度为横坐标,对检测数据进行处理,后进行线性拟合,最终得到线性回归方程。
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