陕西师范大学刘成辉获国家专利权
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龙图腾网获悉陕西师范大学申请的专利一种基于球形核酸信号放大机制的数字式流式微球生化分析方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116359493B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310313057.6,技术领域涉及:G01N33/543;该发明授权一种基于球形核酸信号放大机制的数字式流式微球生化分析方法是由刘成辉;石静静;范文娇;任伟设计研发完成,并于2023-03-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于球形核酸信号放大机制的数字式流式微球生化分析方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于球形核酸信号放大机制的数字式流式微球生化分析方法,属于蛋白和外泌体标志物检测技术领域。本发明在磁性微球上负载抗体或适配体,在超微含量靶标浓度时,一个磁性微球表面特异性结合单个靶标标志物分子,通过引入功能化球形核酸极大地提高蛋白或外泌体到核酸的转换效率,使单个靶标标志物分子在微球表面引发大量核酸扩增和富集足够的荧光信号点亮该单个磁性微球,即为阳性微球,而没有结合靶标标志物分子的磁性微球无法结合功能化球形核酸和引发核酸扩增以及富集荧光信号,即为阴性微球。采用普通的流式细胞仪就可明显区分阳性微球和阴性微球,通过计数阳性微球的个数实现蛋白或外泌体标志物的数字式分析。
本发明授权一种基于球形核酸信号放大机制的数字式流式微球生化分析方法在权利要求书中公布了:1.一种基于球形核酸信号放大机制的数字式流式微球生化分析方法,其特征在于,包括以下步骤: S1,制备同时负载识别元件和核酸探针的功能化球形核酸;将特异性识别靶标标志物分子的捕获抗体或适配体负载于磁性微球上,得到功能化磁性微球; S2,通过S1功能化磁性微球表面的捕获抗体或适配体特异性地与靶标标志物分子结合,形成负载1个或0个靶标标志物分子的磁性微球; S3,通过S2磁性微球上的靶标标志物分子特异性与S1功能化球形核酸的识别元件进行结合,形成磁性微球-单个靶标标志物分子-功能化球形核酸的三明治复合结构; S4,在S3的三明治复合结构的单个靶标标志物分子上引发滚环扩增反应,并富集荧光团从而点亮对应的磁性微球,即为阳性荧光磁性微球;而S2中负载0个靶标标志物分子的磁性微球不会引发滚环扩增反应和富集荧光团,即为阴性荧光磁性微球; S5,利用流式细胞仪区分S4中的阳性荧光磁性微球和阴性荧光磁性微球,根据阳性荧光磁性微球的个数或比例实现靶标标志物的数字式分析。
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