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龙图腾网获悉宜春学院申请的专利利用基因编辑技术创制甘蓝型油菜矮化材料的方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115838757B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211104290.5，技术领域涉及：C12N15/84；该发明授权利用基因编辑技术创制甘蓝型油菜矮化材料的方法和应用是由支添添;周舟设计研发完成，并于2022-09-09向国家知识产权局提交的专利申请。

本利用基因编辑技术创制甘蓝型油菜矮化材料的方法和应用在说明书摘要公布了：本发明属于植物基因工程和生物技术领域，特别涉及一种利用CRISPRCas9基因编辑技术创制甘蓝型油菜矮化材料的方法和应用。该方法通过利用CRISPRCas9基因编辑技术编辑甘蓝型油菜BnaA06G0083400WE基因，获得甘蓝型油菜矮化材料；所述甘蓝型油菜矮化材料的编码基因突变体的核苷酸序列为SEQIDNO.1。本发明通过CRISPRCas9基因编辑技术对甘蓝型油菜BnaA06G0083400WE基因进行基因编辑，得到矮化的甘蓝型油菜，为甘蓝型油菜育种提供宝贵的基因资源和种质资源；该方法特性强，容易获得，是实现目标性状改良，培育新材料的有效途径，可应用于油茶育种中。

本发明授权利用基因编辑技术创制甘蓝型油菜矮化材料的方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种利用基因编辑技术创制甘蓝型油菜矮化材料的方法，其特征在于，通过利用CRISPRCas9基因编辑技术编辑甘蓝型油菜BnaA06G0083400WE基因，获得甘蓝型油菜矮化材料； 所述甘蓝型油菜矮化材料的编码基因突变体的核苷酸序列为SEQIDNO.1； 所述方法包括以下具体步骤： 1甘蓝型油菜BnaA06G0083400WE基因CRISPRCas9表达载体的构建： 1sgRNA靶位点的选择： 所述sgRNA靶位点是针对甘蓝型油菜westar中BnaA06G0083400WE基因不同拷贝的结构和同源关系，基于CRISPRdirect网站设计，核苷酸序列为： SEQIDNO.2：5’-agaggtcaaggccatccacaagg-3’； 所述sgRNA靶位点的核苷酸序列选自甘蓝型油菜westar中BnaA06G0083400WE基因的第六个外显子区域； 2引物设计和PCR扩增： 所述引物序列如下： SEQIDNO.3：5’-cagtGGTCTCagtcaagaggtcaaggccatccaca-3’； SEQIDNO.4：5’-cagtGGTCTCaaaactgtggatggccttgacctct-3’； 所述PCR扩增过程如下：按50μL体系的PCR反应，以上下游引物混合，经PCR仪变性退火得到gRNA片段； 3CRISPRCas9表达载体的构建与农杆菌转化： 利用T4连接酶将步骤2所得gRNA片段与经过BsaIEco31I酶切的CRISPRCas9质粒进行T4连接，然后将连接产物转化大肠杆菌DH5a并用抗生素进行筛选后，做菌落PCR鉴定以及测序验证，得到表达载体； 将验证含有sgRNA的载体转化农杆菌，进行菌落PCR验证得到含有表达载体的农杆菌菌株； 2甘蓝型油菜BnaA06G0083400WE基因CRISPRCas9基因编辑突变体的获得与鉴定： 1将预培养的下胚轴置于含有表达载体的农杆菌悬浮液中，进行愈伤的诱导，将产生愈伤的下胚轴转移至诱导诱导胚性愈伤生成的培养基上，进行胚性细胞的诱导，油菜遗传转化幼苗的分化与筛选同时进行，在分化培养基中加入相应的抗生素，分为初筛和二筛，得到阳性苗后进行幼苗生根培养； 2利用PCR检测阳性甘蓝型油菜幼苗中的CRISPRCas9表达载体，通过测序检测CRISPRCas9基因编辑植株中BnaA06G0083400WE基因的编辑状况； 3验证甘蓝型油菜westar和BnaA06G0083400WE基因CRISPRCas9基因编辑突变体在株高方面的差异。

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